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一步法DNA擴增試劑盒

  • 產品型號:
  • 更新時間:2024-12-24

簡要描述:產品說明
本產品直接以血液為模板,用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 進行擴增,擴增產物直接通過電泳檢測。
適用范圍
1. EDTA、肝素、檸檬酸鈉抗凝方法保存的新鮮或冷凍血樣;
2. 未加抗凝劑的血樣和干血;
3. 血液基因組的擴增檢測。

產品詳情

產品介紹                      

本試劑盒以血液為模板直接進行DNA擴增,擴增產物可直接點樣電泳。該試劑盒中含有設計的Taq酶突變體,這些使它能夠耐受全血樣品中存在的抑制劑。在大多數抗凝劑存在下,包括肝素、檸檬酸和EDTA等,Taq酶依然擴增性能良好。由于其可以從血液直接進行擴增,免除了繁瑣的DNA提取步驟,加快了工作流程,降低了污染的風險。


產品特點

1. 簡便:無需事先對血液進行提純,直接用血液為模板擴增目的基因;

2. 高效:多數抗凝劑存在條件下,*的抗抑制能力,能有效擴增雜質較多的模板。


產品用途

1.未加抗凝劑的血液樣本;

2.添加了肝素、檸檬酸、EDTA 等抗凝劑的血液樣本;

3.血液基因組擴增檢測。


使用建議

1.使用時添加≤10%的全血為模板,若擴增不出目的條帶, 酶量可加倍。加上血液后將管中各組分輕輕混勻。

2.2mM Mg2+可以滿足絕大多數 PCR 擴增,對于某些 PCR, 為了保證較好的擴增,可調

節(jié)為 2-5mM。


保存溫度

-20℃保存。


產品組分

產品組成

體積

2 × Direct Blood PCR Buffer with Mg2+

1.25ml

dNTPs(各 10mM

100μl

Direct Taq DNA 聚合酶(400U

100μl






常用反應體系 (25μl):

2 × Direct Blood PCR Buffer (with Mg2+*

10μl

上游引物

0.2-1.0 μM(終濃度)

下游引物

0.2-1.0 μM (終濃度

dNTPs(各10mM)

1μl

全血

0.1-2.5μl

Direct Taq DNA 聚合酶(400U)

1μl

ddH2O

至 25 μl

*Mg2+終濃度為 3.5mM


常用PCR設置

當擴增片段<3K

當擴增片≥(推薦引物長度≥30bp)


94℃, 1 分鐘 30 秒

94℃,20 秒            

55-60℃,20 秒         30-40循環(huán)

72℃,1kb/60 秒

72℃ 5 分鐘

4℃ 保溫


94℃, 5 分鐘

94℃,15 秒            30-40循環(huán)          

68℃,1kb/60 秒    

72℃ 5 分鐘

4℃ 保溫



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